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菌落计数器查看液相色谱法检测真菌毒素

2011-11-27   来源:   浏览:1314

由于真菌毒素性质不同,加上分析条件之间相互影响、相互制约,为达到理想的分离效果,分析时要综合考虑流动相、色谱柱、柱温和检测器等分析条件,找出最佳配比。某些自身产生荧光的真菌毒素如OTA和麦角碱,可直接用配有荧光检测器的HPLC分析,而其他一些分子中不含发色基团(如伏马菌素)或本身可产生荧光但强度较弱(如AFBl和AFGl)的毒素进行HPLc分析时,需经柱前或柱后衍生、改变流动相条件(如使用离子对试剂、改变流动相pH等)以增强荧光信号方能定量检测。

用于增强AFBl和AFGl荧光强度的试剂包括柱前衍生剂三氟乙酸(tr小luoroaceticacid,TFA)、亚硫酸氢钠和柱后衍生剂口一环状糊精及一些光化学衍生剂。净化后的样品提取液经TFA柱前衍生后,用RP—HPLC配有荧光检测器分析AFs一直是过去十年最常用且简单的方法。但由于AFBl和AFGl经TFA柱前衍生形成的衍生物AFB2。和AFG2。性质不稳定,并且分析过程额外增加了一步反应,加大了操作误差,因此TFA柱前衍生近来逐渐被碘、溴溶液及电化学柱后衍生技术所取代。

虽然碘溶液柱后衍生检测AFs的方法已被AOAc采纳,但由于存在衍生剂对色谱系统的腐蚀破坏、碘溶液不稳定需现用现配增加工作量等一系列问题,现许多实验室以溴溶液(如溴氢化吡啶嗡)或电化学法产生的溴代替碘溶液,进行柱后在线衍生检测玉米、花生、干果中的AFBl和尿中的AFBl、AFB2、AFGl、AFG2、AFMl和AFQl。电化学衍生装置是利用电化学原理,以在线产生的溴为衍生剂,具有操作简便、易于安装维护、无需控制反应温度和流速比例、免去每日制备饱和碘溶液等优点,与柱前衍生方法相比,极大地提高了分析灵敏度,但缺点是衍生所需装置昂贵,不适于广泛推广。

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